La sala dedicata a Michelangelo e ai Pittori Fiorentini, recentemente rinnovata, mostra opere appartenenti alla fine del quindicesimo – inizio sedicesimo secolo.
Le pareti di questa sala sono di un rosso intenso, in realtà un cremisi, che cattura l'attenzione fin dal corridoio.
La sala 35 è senza dubbio una delle più attraenti della Galleria degli Uffizi. Il motivo è che in essa si trova esposto l'unico dipinto su supporto mobile di Michelangelo, il Tondo Doni. La forma di tale opera è rotonda, da qui il nome "Tondo". Fu una commissione privata: Michelangelo lo dipinse infatti per Agnolo Doni, un ricco mercante fiorentino.
Michelangelo Buonarroti, il grande scultore del Rinascimento, mostra qui la sua straordinaria abilità nel dipingere.
Assolutamente innovativi sono i colori utilizzati da Michelangelo in questo capolavoro: i Manieristi li apprezzeranno molto.
Altre opere di Pittori del Rinascimento Fiorentino circondano il Tondo Doni, fra cui: Noli me tangere di Andrea del Sarto, la Madonna con bambino e Santi del Franciabigio, La Visione di San Bernardo di Frà Bartolomeo, la Visitazione di Mariotto Albertinelli e altri.